基因擴增儀的基本要素分析
更新時間:2022-11-25 點擊次數:1329次
基因擴增儀是一款多功能、多用途的PCR儀,可滿足不同PCR反應管、不同孔數及不同類型PCR實驗要求。優異的升降溫速度、溫度控制保證了實驗快速、準確,超大屏幕顯示和人性化的操作界面使操作更簡單易懂。
基因擴增儀的基本要素與DNA復制的基本要素是一致的:
1、DNA模板:待拷貝的DNA稱為模板,它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA,擴增得到的產物是雙鏈狀態的。
2、引物:是DNA復制的先鋒,就象結晶過程中的晶核,引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA復制的動力,在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
4、緩沖液:提供DNA合成反應所需的pH,離子強度等環境。
5、4種單核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
它可以在試管里建立反應,經過數小時之后,就能將極微量的目的基因或者某一特定的DNA段擴增數十萬倍,乃至千百萬倍,而無需通過繁瑣費時的基因克隆程序,便可獲得足夠數量的精確的DNA拷貝,所以有人亦稱之為無細胞的分子克隆法。
PCR反應一般設置20~40次循環,每一循環包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應。每一循環的產物作為下一個循環的模板。PCR的擴增效率很高,如果循環次數是30次,那么新生DNA段理論上達到230拷貝(約為109個分子)。擴增時加入的引物利用熒光素進行標記,使引物和熒光探針同時與模板進行特異性結合,擴增結果通過熒光信號采集系統實時采集信號并輸送到計算機分析處理系統,實時輸出量化結果。